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恒奧德紫外可見分光光度計(jì)操作步驟原理波長范圍 190nm~1100nm
更新時(shí)間:2025-12-10
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恒奧德紫外可見分光光度計(jì)操作步驟原理波長范圍 190nm~1100nm
是一種基于物質(zhì)對(duì)紫外和可見光區(qū)域(通常為200-800納米)輻射的選擇性吸收來進(jìn)行定性和定量分析的儀器。?
核心原理
其基本原理是?朗伯-比爾定律?(Lambert-Beer Law),該定律指出:當(dāng)一束單色光穿過溶液時(shí),溶液的吸光度(A)與溶液的濃度(c)和液層厚度(b,即光程長度)成正比,數(shù)學(xué)關(guān)系為 A = εbc(其中ε為摩爾吸光系數(shù))。?
吸光度A與透光率T的關(guān)系為 A = -log??(T)。?
物質(zhì)分子吸收特定波長的光后,會(huì)發(fā)生電子能級(jí)躍遷,不同物質(zhì)因其分子結(jié)構(gòu)不同,具有特征吸收光譜,據(jù)此可進(jìn)行定性分析;而通過測量特征波長處的吸光度大小,可實(shí)現(xiàn)定量分析。?
儀器主要部件
儀器通常由以下五部分組成:?
?光源?:提供連續(xù)光譜。紫外光區(qū)常用氘燈或氫燈(波長范圍約180-360納米),可見光區(qū)常用鎢燈或鹵鎢燈(波長范圍約350-1000納米)。?
?單色器?:將光源發(fā)出的復(fù)合光分解并分出所需波長的單色光,核心元件為棱鏡或光柵。?
?吸收池(比色皿)?:用于盛放待測溶液。可見光區(qū)可用玻璃池,紫外光區(qū)必須使用石英池,以避免吸收紫外光。?
?檢測器?:將透過溶液的光信號(hào)轉(zhuǎn)換為電信號(hào),常用光電管、光電倍增管或二極管陣列檢測器。?
?信號(hào)處理器與顯示系統(tǒng)?:對(duì)檢測器輸出的信號(hào)進(jìn)行放大、處理并顯示結(jié)果(如吸光度、透光率或吸收光譜圖)。?
基本操作步驟
雖然不同型號(hào)的儀器操作細(xì)節(jié)可能略有差異,但核心流程相似:?
?開機(jī)預(yù)熱?:接通電源,讓光源和檢測器穩(wěn)定工作,通常需要預(yù)熱15-30分鐘。
?波長選擇?:通過儀器面板或軟件選擇所需的測量波長(例如,掃描整個(gè)波長范圍以獲取吸收光譜,或選擇特定波長進(jìn)行定量分析)。?
?空白對(duì)照校準(zhǔn)?:將裝有純?nèi)軇瞻滓海┑奈粘胤湃牍饴罚础罢{(diào)零"或“參比"鍵,將此時(shí)的吸光度設(shè)為零點(diǎn)(即透光率為100%)。這是為了扣除溶劑等背景的吸收影響。?
?樣品測量?:將裝有待測溶液的吸收池放入光路,儀器直接顯示該溶液在指定波長下的吸光度或透光率。?
?數(shù)據(jù)記錄與分析?:記錄測量結(jié)果。對(duì)于定量分析,通常需要繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或使用對(duì)照品比較法
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